單克隆抗體定制

單克隆抗體多克隆抗體定制

1. 重組蛋白定制
（1）原核表達系統(tǒng)：
將克隆化基因插入合適載體后導入原核生物用于表達大量蛋白質的方法一般稱為原核表達。主要包括：大腸桿菌表達系統(tǒng)、枯草芽孢桿菌表達系統(tǒng)、鏈霉菌表達系統(tǒng)等，其中應用廣泛的是大腸桿菌表達系統(tǒng)。    
（2）酵母表達 ：
酵母表達系統(tǒng)是研究真核蛋白質表達和分析的有力工具，擁有轉錄后加工修飾功能，適合于穩(wěn)定表達有功能的外源蛋白質。與昆蟲表達系統(tǒng)和哺乳動物表達系統(tǒng)相比，酵母表達系統(tǒng)操作簡便，成本低廉，可大規(guī)模進行發(fā)酵。
（3）哺乳動物細胞表達：
哺乳動物細胞表達系統(tǒng)的優(yōu)勢在于能夠指導蛋白質的正確折疊，提供復雜的N型糖基化和準確的O型糖基化等多種翻譯后加工功能，因而表達產物在分子結構、理化特性和生物學功能方面接近于天然的高等生物蛋白質分子。
目前已有許多重要的蛋白及糖蛋白利用哺乳動物細胞表達系統(tǒng)大量制備、生產。如：人組織型血纖蛋白酶原激活因子、凝血因子Ⅷ、干擾素、乙肝表面抗原、紅血球生成激素、人生長激素等。

2. 單克隆抗體制備
抗原上可以引起機體產生抗體的分子結構，叫做抗原決定簇，抗原通常是由多個抗原決定簇組成的。單克隆抗體是針對專一的抗原決定簇產生的抗體，主要原理是利用產生抗體的B淋巴細胞與腫瘤細胞雜交融合成雜交瘤細胞，來生產抗體。 

3. 多克隆抗體制備
抗原上可以引起機體產生抗體的分子結構，叫做抗原決定簇，抗原通常是由多個抗原決定簇組成的，由多種抗原決定簇刺激機體，相應地就產生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;同樣一類抗原決定簇，也可刺激機體產生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。

4. 蛋白純化
包涵體變復性
親和層析、離子交換層析、凝膠過濾層析、疏水層析純化規(guī)模：毫克-克級
蛋白除菌、除內毒素
蛋白凍干